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层析冷柜厂家介绍凝胶过滤色谱的原理特点、特性参数含义
点击次数:1271 发布时间:2015-10-19 打印本页面 返回
 一、凝胶过滤色谱的原理及其特点
 
1、原理:凝胶过滤层析又称凝胶排阻色谱,分子筛色谱法,凝胶过滤法等。利用凝胶过滤介质为固定相,根据物料中溶质相对分子质量的差异的液相色谱法。
 
2、特点:(1)操作方便,条件温和,不会使物质变性;(2)色谱介质不需再生,可反复便用。(3)分离效率高,回收率较高。(4)广泛应用于生物大分子的初级分离,脱盐等。(5)分辨率较低,需采用细长柱。(6)经过凝胶过滤色谱后样品被稀释,上样前需进行浓缩。
 
二、凝胶过滤色谱的凝胶特性参数及其具体含义
 
(1)排阻极限(exclusionlimit)是指不能扩散到凝胶基质内部中去的小分子的分子量。(SephadexG-50的排阻极限是30kDa)。
 
(2)分级范围(Fractionationrange)它指出了当溶液通过凝胶柱时,能够为介质阻滞并且分离的溶质分子量范围(SephadexG-50,它的分级范围为1500—30000)。
 
(3)吸水量(Waterregains)1g干凝胶所吸收的水分称为吸水量(SephadexG-50的吸水量为5.0±0.3g)。溶胀率=吸水量×100%。
 
(4)凝胶粒径凝胶颗粒一般为球形,其粒径大小对分离度有重要影响(粒径越小,其分离效率越高)。100-200目(50-150μm)。
 
(5)床体积(Bedvolume)表示1g干胶在溶胀后所具有的后体积(SephadexG-50的床体积为9—11ml/g干凝胶)。
 
(6)空隙体积(Voidvolume)表示填充柱中凝胶粒子周围的总空间即V0(用平均分子量为2000kDa蓝色葡聚糖测出)。

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